1、项目合作

本中心依托南京先进激光技术的资源，对外开展各种形式的项目合作，如接受委托项目研发、共同合作开发、科技成果产品转化、联合项目申报等多种服务形式，结合本中心的定位，可以提供的项目合作范围如下：

1）自动化样本处理类定制仪器研发

2）生物化学发光/荧光检测类定制仪器研发

3）特殊生物检测用光源的定制研发

4）纳米级功能材料的定制研发

5）各类基于核酸和蛋白质诊断试剂合作研发

2、技术服务

1）免疫荧光染色（单染或双染）

技术服务信息

服务名称：常规免疫组织化学染色

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京市栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

荧光抗体法是一种将抗原、抗体的结合反应与形态学相结合的方法。该法把血清学的特异性、荧光色素的敏感性、显微镜检查法集为一体，扩大了免疫学诊断的效果，是近代免疫学的一种重要研究手段?？固迩虻鞍妆昙巧嫌馍?，即成为荧光抗体。

服务内容

1.荧光染色：免疫荧光染色。

2.实验结果显微照相（每张染好的切片照一张典型结果图）。

样品要求

1.客户需提供石蜡切片/冰冻切片/细胞爬片，及目的蛋白一抗及说明书（或南京先进激光技术研究院代购并提供发票）。

2.组织切片厚度小于50μm。

3.目的蛋白一抗可以是浓缩液也可以是工作液。

4.用于石蜡包埋的组织，活检或手术切除标本应在2小时内取材或固定，避免组织自溶及抗原变性等影响免疫组化结果。

5.用于冰冻切片的组织，取材后应立即放如液氮冷冻，然后放入-80℃保存。

6.取材时应保持所检标本原有的结构、形态，为避免挤压组织，尽量使用锋利刀片，并且避开坏死组织，除取病灶或含待检抗原部位外，还应取病灶与正常交界处，即所取组织切片中同时应有抗原阳性和阴性区，以形成自身对照。

终产品

1.1张显微镜图片/张切片；

2.染色后的切片；

3.完整实验报告。

服务说明

采用荧光抗体技术进行检测。预实验与正式试验均按照切片张数进行收费。若切片<10张，一次服务收费￥500(单染)或￥800（双染）。

2）常规免疫组织化学染色

技术服务信息

服务名称：常规免疫组织化学染色

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、病原体以及受体等)。

服务内容

1.染色：常规免疫组织化学染色。

2.实验结果显微照相（每张染好的切片照一张典型结果图）。

样品要求

客户需提供石蜡切片/冰冻切片/细胞爬片，及目的蛋白一抗及说明书（或南京先进激光技术研究院代购并提供发票）。

组织切片厚度小于50μm。

目的蛋白一抗可以是浓缩液也可以是工作液。

用于石蜡包埋的组织，活检或手术切除标本应在2小时内取材或固定，避免组织自溶及抗原变性等影响免疫组化结果。

用于冰冻切片的组织，取材后应立即放如液氮冷冻，然后放入-80℃保存。

取材时应保持所检标本原有的结构、形态，为避免挤压组织，尽量使用锋利刀片，并且避开坏死组织，除取病灶或含待检抗原部位外，还应取病灶与正常交界处，即所取组织切片中同时应有抗原阳性和阴性区，以形成自身对照。

最终产品

1张显微镜图片/张切片；染色后的切片；完整实验报告。

服务说明

采用SP(三步法)或二步法免疫组化试剂盒进行检测，DAB显色。预实验与正式试验均按照切片张数进行收费。

3）蛋白免疫印记（Western blot）

技术服务信息

服务名称：蛋白免疫印记（Western blot）

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床　

蛋白印迹（Western Blot） 是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法，用于检测经电泳或斑点杂交后固定于膜上的蛋白质的检测。特异、稳定的液态酶标抗体和相应的底 物，保证了快速、准确的检测；而避免了非特异性物质的使用，现已成为蛋白分析的一种常规技术，对蛋白进行定性和半定量分析。

服务内容

通过预实验优化实验条件，摸索一抗稀释度，选择其中最佳的一个稀释度进行正式实验。

样品要求

客户需新鲜或正确保存的蛋白样品，目的蛋白阳性表达样品（有阳性表达的细胞或组织）， 检测目的蛋白的一抗若由客户提供，报价按XMS2302执行，若目的蛋白的一抗由南京先进激光技术研究院提供，报价按XMS2301。
样品要求为：裂解样品总蛋白量>500μg/样品。细胞样品总蛋白浓度＞1mg/ml。组织样品总蛋白浓度 10~15mg/ml。
 

最终产品

凝胶成像系统曝光原文件；完整实验报告。

服务说明

建议提供目的蛋白阳性表达样品（纯蛋白或有阳性表达的细胞或组织）作为阳性对照。每张膜可检测1~8个样品。用户可指定内参，可选β-actin和/或GAPDH。一抗需在正确条件下保存，避免污染及反复冻融。如需进行数据分析，请另询价。

4）HE染色

技术服务信息

服务名称：HE染色

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学科研中最基本，使用最广泛的一种染色方法。主要用于观察组织的形态与结构。

服务内容

提供常规苏木素-伊红染色（Haematoxylin and Eosin，HE染色），并对染色后的结果进行显微照相。

样品要求

客户需提供石蜡切片/冰冻切片/细胞爬片。

最终产品

染色后的切片；每张切片提供一张照片；完整实验报告。

服务说明

请提供组织切片，若切片<20张，一次服务收费￥500。

5）实时荧光定量PCR

技术服务信息

服务名称：实时荧光定量PCR

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

相对定量 (mRNA表达量分析)：基因表达的研究一般采用相对定量的方法。相对定量法必须对样品的目的基因和内参基因同时分别进行定量，然后求出对于内参基因的目的基因的相对量。通过对样品间的目的基因的相对量进行比较，可以对不同样品间的mRNA进行表达量分析。内参基因通常选用表达量相对恒定的Housekeeping Gene，如：GAPDH、β-actin等。通过同时对内参基因的实时检测，可以对样品之间由于起始细胞数不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量误差进行校正，达到在严格意义上对样品之间的mRNA表达量进行分析之目的。
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累，因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

服务内容

以荧光定量PCR方法对样本基因表达进行相对定量。

样品要求

客户需提供组织、细胞、血液等样品材料，或纯化好的总RNA或总DNA，反转录好的cDNA样品，具体要求如下：

最终产品

目的基因剩余引物 (上游引物和下游引物，合成量≥2OD)；目的基因引物序列；相对定量实验报告；剩余探针。

服务说明

客户提供基因序列。以上报价是以提取的核酸（DNA或cDNA）为起始材料设定的，如果需要进行核酸纯化，费用另计。如因实验材料等非本中心原因造成某实验步骤失败，使实验提前终止，已启动的实验项目仍正常收费?；固峁┚远糠?，客户需提供标准品，若需制备标准品，费用另计。

6）普通PCR及逆转录PCR

技术服务信息

服务名称：普通PCR及逆转录PCR

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床　

逆转录也称反转录，是以RNA为模板合成DNA的过程，是RNA病毒的复制形式，需逆转录酶的催化。用组织细胞提取mRNA并以它为模板，在反转录酶的作用下，合成出互补的DNA(cDNA)，由此可构建出cDNA文库(cDNA library)，从中筛选特异的目的基因，这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。也可以利用cDNA进行荧光定量PCR进而研究基因的表达量。

服务内容

1.以DNA为模板直接进行PCR（XMS2601）或以总RNA或mRNA为模板逆转录成cDNA （XMS2602）。

2.PCR扩增看家基因检测cDNA合成的效率。

样品要求

客户需提供组织、细胞、血液等样品材料，或纯化好的总RNA或总DNA，反转录好的cDNA样品，具体要求如下：

最终产品

cDNA；完整实验报告。

服务说明

客户须在实验开始前确保其细胞或组织中有目的基因的表达，并提供目的基因的相关信息。以上报价是以提取的核酸（DNA、cDNA或总RNA、mRNA）为起始材料设定的，如果需要进行核酸纯化，费用另计。如因实验材料等非本中心原因造成某实验步骤失败，使实验提前终止，已启动的实验项目仍正常收费。PCR过程中的所需引物，可以由客户提供，也可以由客户委托中心设计合成。中心将进行预实验，摸索扩增条件?？梢酝碧峁┌ㄗ躌NA提取、引物合成等一系列相关服务。

7）RNA提取

技术服务信息

服务名称：RNA提取

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

RNA 提取与纯化技术是现代分子生物学技术的基础，cDNA文库构建、蛋白质体外翻译、RNA序列分析及Northern Blot等都需要一定纯度和一定的完整性的RNA。完整性好和纯度高是评价RNA质量的两个关键标准。要获得完整的RNA取决于能否最低限度地避免纯化过程中内源及外源性RNase对RNA降解；要获得纯度高的RNA取决于能否有效去除RNA提取中DNA和蛋白质。

服务内容

从新鲜组织、血液、细胞等多种材料中提取总RNA，通过电泳及OD值测定检测RNA纯度。

服务优势

通过电泳及OD值测定检测RNA纯度，保证实验质量?？商崛「丛友局械淖躌NA。

样品要求

客户需提供新鲜的组织、血液、细胞等，从不同材料中提取总RNA差异比较大，现就一般材料的样品要求及起始量列表如下：

最终产品

总RNA样品；完整实验报告：电泳照片，OD值测定结果。

服务说明

细胞样品需新鲜培养；动物组织、植物组织等样品取样后需液氮速冻。用于提取总RNA的血液样品需在-80℃下保存。实验样品最好使用干冰运输或保存在RNA store Reagent中。核酸提取为南京先进激光技术研究院的特长，关于任何核算提取有关的问题都可向我中心询问。

8）DNA提取

技术服务信息

服务名称：DNA提取

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此DNA的提取是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作?；蜃镈NA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交、分子标记及PCR检测等。

服务内容

从新鲜组织、血液、细胞、细菌、病毒等多种材料中提取基因组DNA，通过电泳及OD值测定检测DNA纯度。

样品要求

客户需提供血液、培养细胞、组织、细菌、病毒等，从不同材料中提取基因组DNA差异比较大，现就一般材料的样品要求及起始量列表如下：

最终产品

基因组DNA；完整实验报告：电泳照片，OD值测定结果。

服务说明

细菌、细胞样品需新鲜培养；动物组织、植物组织等样品取样后需液氮速冻。用于提取基因组DNA的血液样品在4℃下可保存一周，-20℃下可保存1个月。实验样品最好使用干冰运输。通过电泳及OD值测定检测DNA纯度，保证实验质量?？商崛「丛友局械幕蜃镈NA。核酸提取为南京先进激光技术研究院的特长，关于任何核算提取有关的问题都可向我中心询问。

9）ELISA检测

技术服务信息

服务名称：ELISA检测

允许参观：允许参与实验

所在区域：南京栖霞区

服 务 商：南京先进激光技术研究院

使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床

竞争法ELISA和夹心法ELISA一般用于检测样品中某抗原或抗体的含量，很多常用的指标目前都有商售的检测试剂盒。

服务内容

竞争法或夹心法测定抗原。

竞争法实验流程

1.将抗体吸附在固相载体表面。

2.加入酶标抗原和待测抗原。

3.加入底物。

4.结果判定：对照孔与样品孔有色产物的生成量的差与未知抗原的量成负相关。

夹心法实验流程

1.将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面。

2.加抗原，形成抗原-抗体复合物。

3.加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物。

4.加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体)。

5.加入底物。

6.结果判定：有色产物的生成量＝抗原量。

样品要求

客户需提供待检测样品和检测试剂盒。检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。样本收集后应立即-20保存，若长期保存应-70。样本量的要求：若一个指标做复孔检测应不少于250μl，做单孔检测应不少于120μl。建议若客户样本量充足最好提供500μl以上。

最终产品

检测试验报告。

服务说明

客户的样本收集后，立即按要求保存，切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与技术支持沟通确认。